常见微生物标本采集方法
一、基本原则
1、 发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，
二、三级医院微生物标本送检率不应低于70%。
2、 尽量在抗菌药物使用前采集标本。
3、 标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。
4、 标本采集后应立即送至实验室。床边接种可提高病原菌检出率。
5、 以棉拭子采集的标本如咽拭、肛拭或伤口拭子，宜采用插入运送培养基送检。
6、 混有正常菌群的标本如咳痰、尿液、伤口拭子，不可置肉汤培养基内送检。
7、 盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。
8、 送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。
二、常见感染标本采集与送检方法
(一)、血液及骨髓
1、通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
2、采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养基前，应列换针头或过火消毒针头。
3、每次采血量成人5-10ml，婴幼儿1-2ml，培养基与血液之比以10∶1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。
4、怀疑菌血症庆尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。对已用抗菌药物而不能停药者，可在下次用药前采血。
5、对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶或者髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓1 ml作增菌培养。
(二)、尿液
1、中段尿：女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及阴部及尿道口;男性翻转包皮冲洗，用0.1%新洁尔灭消毒尿道口，灭菌纱布擦干后，收集标本。
2、导尿管导尿采样可减少污染。对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用联空针筒的细针斜穿管壁抽吸尿液;或拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。
3、尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难，或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤穿刺采集无污染的膀胱内尿液。
4、送检标本以晨起第一次尿液为佳。
5、室温下尿标本担搁稍久可致尿内细菌浓度明显增加而影响病原菌与污染菌的区分。不能立即送检者，可暂存4℃冰箱。
(三)痰液
1、咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。痰量极少者可用45℃ 10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。
2、对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。
3、双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液。
4、对重症、难治，或伴免疫抑制，或疑似厌氧菌引起的医院内肺部感染，可采用环甲膜穿刺经气管吸引(TTA)、经胸壁穿刺肺吸引(LA)、经纤维支气管镜或人工气道作防污染双套管毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)采集无口咽部菌群污染的痰液，进行精确的感染病原学诊断。
5、痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。室温下延搁数小时定植于口咽部的非致病菌呈过度生长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出率则明显下降。
(四)脓汁或创面分泌物
1、无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检。
2、对未溃破的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检;也可于切开排脓时用无菌棉拭采样。
3、采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。
(五)粪便
1、排便后，挑取有脓血、粘液部分的粪便约2-3克(液状粪便则取絮状物)，成盛于灭菌广口瓶或蜡纸盒送检。用棉拭挑取粪便插入Cary-Blair运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油中送检，可提高病原菌检出率。
2、对为易获取粪便者或婴幼儿，可用直肠拭子(又称肛拭子)采集。将拭子前端用无菌甘油水湿润，然后插入肛门约4-5cm(幼儿约2-3cm)处，轻轻旋转擦取直肠表面粘液后退出，置运送培养基内送检。
(六)咽拭、口腔拭子
1、病人清水嗽口后，由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引，棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧，反复擦拭数次，插入运送培养基。棉拭子应避免触及舌、口腔粘膜和唾液。
2、对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，用棉拭在病灶部位擦拭数次即可。
(七)浆膜腔积液、脑积液
1、浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液和鞘膜液等，以严格无菌操作抽取数亳升液体置无菌试管或小瓶送检。对易自凝的标本可添加抗凝剂。
2、严格无菌操作下采取脑脊液数毫升于无菌试管。标本采集后应立即送检，以防细菌死亡。疑似有脑膜炎奈瑟菌时，应注意保暖，不可置冰箱保存。
(八)生殖道标本
1、根据不同感染种类和病变特征采集不同的标本。采集尿道标本时，先用生理盐水局部清洗，以无菌棉拭子插入尿道口1-2 cm停留十余秒钟，轻轻旋转拭子后退出。
2、对外阴部糜烂、溃疡，生理盐水清洗后用棉拭擦取病灶边缘的分泌物。
3、阴道和宫颈口分泌物须在窥阴器下用长棉拭采集。
4、子宫内分泌物需用无菌导管抽取。导管外套一层保护膜，插入子宫后再刺穿该膜予负压吸引，可减少阴道菌群污染。
5、女性盆腔脓肿，应在阴道局部消毒后，由直肠子宫陷凹处进针抽取。
6、前列腺液需进行前列腺按摩获取。
(九)组织标本
1、表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术切除对窦道和瘘管应深部刮取，获得部分管壁组织。
2、深部组织标本可经皮穿刺采集或手术切取。标本置无菌容器并加入少量生理盐水以保湿度，或置肉汤增菌液，或置血平皿内送检。
3、尸检标本应于死后20h内采取，以防肠道等菌群侵入引起污染。
4、作病原菌分离的组织标本，不可用福尔马林固定。疑有污染的较大组织块，可用烧红的烙铁烧灼其表面或置沸水中5-10秒钟使表面变白消除污染后，再用无菌器械切开组织，取中央部位组织送检。
(十)静脉导管
1、从病人体内拔出静脉插管，用无菌技术剪去导管体外部分。体内段导管立即置血琼脂平板上作滚动涂布接种。不能作床边接种者，将导管置含有少量生理盐水的无菌试管内送检。
2、也可将剪下的导管体内段置肉汤增菌液或用于血培养的培养液内，但不能区分导管感染菌与少量的定植菌。
课程设计报告
心电信号采集
指导老师：
学号： 姓名： 学号： 姓名： 学号： 姓名：
起止日期：
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目录
一、 前言 ———————————————————— 3
二、 心电信号简介 ———————————————— 3
三、 实验要求 —————————————————— 5
四、 软件设计及仿真 ——————————————— 6
五、 硬件电路及仿真 ——————————————— 12
六、 人体测量结果 ———————————————— 13
七、 实验总结 —————————————————— 14
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一、前言
心脏是人体血液循环的动力泵，心脏搏动是生命存在的重要标志，心脏搏动节律也是人体生理状态的重要标志之一。心电信号是心脏电活动的一种客观表示方式，是一种典型的生物电信号，具有频率、振幅、相位、时间差等特征要素，比其他生物电信号更易于检测，并具有一定的规律性。由于心电信号从不同方面和层次上反映了心脏的工作状态，因此在心脏疾病的临床诊断和治疗过程中具有非常重要的参考价值。对心电信号的采集和分析一直是生物医学工程领域研究的一个热点，是一项复杂的工程，涉及到降低噪声和抗干扰技术，信号分析和处理技术等不同领域，也依赖于生命科学和临床医学的研究进展。
人体体表的一定位置安放电极，按时间顺序放大并记录这种电信号，可以得到连续有序的曲线，这就是心电图。心电信号的各种生理参数都是复杂生命体(人体)发出的强噪声条件下的弱信号(除体温等直接测量的参数外)，心电信号的幅度在10µV～4mV之间，频率范围为0.05～100Hz，淹没在50Hz的工频干扰和人体其他信号之中，检测过程及方法较复杂。去除信号检测过程的干扰和噪声、进行心电信号的分析是心电仪器的重要功能之一，心电信号的放大质量直接影响着分析仪器的性能和对人体心脏疾病的诊断。本次设计了一个心电信号检测放大电路，充分考虑了人体心电信号的特点，采用三导联输入—前置放大电路—带通滤波电路—次级放大电路组成的模式，并且利用软件对相应的电路进行仿真，实验结果表明，电路能够很好地完成人体心电信号的检测放大。
关键词：AD620、TL082CP、OP07CP、LM3
58、陷波、右腿驱动、NI ELVIS
二、心电信号简介
1.心电图
心肌是由无数个心肌细胞组成，由窦房结发出的兴奋，按一定的途径和时程，依次向心房和心室扩布，引起整个心脏的循环兴奋。心脏各部分兴奋过程中出现的电位变化的方向、途径、次序、和时间均有一定的规律。由于人体为一个容积导体，这种电变化也必须扩布到身体表面。鉴于心脏在同一时间内产生大量的电信号，因此，可以通过安放在身体表面的胸电极或四肢电极，将心脏产生的电位变化以时间为函数记录下来，这种记录曲线称为心电图，如下图所示。心电图反映心脏兴奋的产生、传导和恢复过程中的生物电变化。心肌细胞的生物电变化时心电图的来源，但是心电图曲线与单个心肌细胞的膜电位曲线有明显的区别。ECG波形是由不同的英文字母统一命名的。
心肌是由无数个心肌细胞组成，由窦房结发出的兴奋，按一定的途径和时程，依次向心房和心室扩布，引起整个心脏的循环兴奋。心脏各部分兴奋过程中出现的电位变化的方向、途径、次序、和时间均有一定的规律。由于人体为一个容积导体，这种电变化也必须扩布到身体表面。鉴于心脏在同一时间内产生大量的电信号，因此，可以通过安放在身体表面的胸电极或四肢电极，将心脏产生的电位变化以时间为函数记录下来，这种记录曲线称为心电图，如下图所示。心电图反映心脏兴奋的产生、传导和恢复过程中的生物电变化。心肌细胞的生物电变化时
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心电图的来源，但是心电图曲线与单个心肌细胞的膜电位曲线有明显的区别。ECG波形是由不同的英文字母统一命名的。正常心电图由一个P波、一个QRS波群和一个T波等组成。P波起因于心房收缩之前的心房极时的电位变化; QRS 波群起因于心室收缩之前的心室除极时的收位变化;T波为心室复极时的电位变化，其幅度不应低于同一导联R波的1/10，T波异常表示心肌缺血或损伤。ECG的持续时间由：P-R间期(或P-Q间期)为P波开始至QRS波群开始的持续时间，也就是心房除极开始至心室除极开始的间隔时间，正常值为0.12～0.20s，若P-R 期延长，则表示房室传导阻滞;Q-T间期为 QRS波群的开始至T波的末尾的持续时间，意为心室除极和心室复极的持续时间，正常值为 0.32～0.44s;S-T段为从QRS波群终末导T波开始之间的线段，此时心室全部处于除极状态，无电位差存在，所以正常时与基线平齐，称为等电位线，若S-T段偏离等电位线一定QRS波群持续时间正常值约为0.06～0.11s范围，则提示心肌损伤或缺血等病变;因此，实时的检测心电信号，可以从所得出的心电图上观察心脏的变化，医生就可以从所测的心电图上判断心脏各个部位的功能是否正常，所以心电图是医生治疗心脏方面的疾病所不可或缺的依据。因此心电检测就有了实际应用的意义。
图1 标准心电图图例
2.人体心电信号的干扰
人体心电信号是一种弱电信号，信噪比低。一般正常的心电信号频率范围为0.05-100Hz，而90%的心电信号(ECG)频谱能量集中在0.25-35 Hz之间。采集一种电信号时，会受到各种噪声的干扰，噪声来源通常有下面几种：
(1) 工频干扰50 Hz工频干扰是由人体的分布电容所引起，工频干扰的模型由50Hz的正弦信号及其谐波组成。幅值通常与ECG峰峰值相当或更强。
(2) 电极接触噪声,电极接触噪声是瞬时干扰，来源于电极与肌肤的不良接触，即病人与检侧系统的连接不好。其连接不好可能是瞬时的，如病人的运动和振动导致松动;也可能是检测系统不断的开关、放大器输入端连接不
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好等。电极接触噪声可抽象为快速、随机变化的阶跃信号，它按指数形式衰减到基线值，包含工频成分。这种瞬态过渡过程可发生一次或多次、其特征值包括初始瞬态的幅值和工频成分的幅值、衰减的时间常数;其持续时间一般的1s左右，幅值可达记录仪的最大值。
(3) 人为运动,人为运动是瞬时的(但非阶跃)基线改变，由电极移动中电极与皮肤阻抗改变所引起。人为运动由病人的运动和振动所引起，造成的基线干扰形状可认为类似周期正弦信号，其峰值幅度和持续时间是变化的，幅值通常为几十毫伏。
(4) 肌电干扰(EMG),肌电干扰来自于人体的肌肉颤动，肌肉运动产生毫伏级电势。EMG基线通常在很小电压范围内。所以一般不明显。肌电干扰可视为瞬时发生的零均值带限噪声，主要能量集中在30-300Hz范围内。
(5) 基线漂移和呼吸时 ECG 幅值的变化 基线漂移和呼吸时 ECG 幅值的变化一般由人体呼吸、电极移动等低频干扰所引起，频率小于 5 Hz;其变化可视为一个加在心电信号上 的与呼吸频率同频率的正弦分量，在 O.015-O.3Hz 处基线变化变化幅度的为 ECG 峰峰值的 15%。
三、实验要求
1.实验仪器设备：
1) 作图工具：TINA原理图编辑器
2) 仿真工具：使用Multisim交互式地搭建电路，然后仿真。 3) 电路图实验设计：面包板
4) 电路测试：使用NI ELVISmx提供电压，显示电路数据。
2.设计要求
体表心电信号是微弱信号，极易受到干扰，心电前置放大电路设计要求尽可以将外界干扰排除，再通过ELVIS平台传到上位机做数字信号处理和显示。要求完成以下技术指标
(一) 电路的放大倍数：800~1000倍。 (二) 电路的共模抑制比：大于75 (三) 电路的输入阻抗：大于20M (四) 电路的信号的频率响应范围：0.05~120Hz
我们要设计的是三导联。心电前置放大电路一般会由两~三级组成，第一级是CMRR很高的差动放大电路，主要用来抑制共模干扰，比如工频电场干扰，但这一级放大倍数一般在10倍左右(为什么这么设定，请大家思考并查资料，采用什么电路方式来提高共模抑制比也可以查资料)。第二级通常是一个两阶低通滤波和放大10倍左右的电路。(请大家去找到合适的两阶滤波器电路，并选用合适的电容与电阻)。最后一级通常是可调放大倍数的放大电路，并提供一个低内阻的输出级。高通滤波一般在前端采用无源的一阶滤波器。
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四、软件设计及仿真
1、前置放大电路和右腿驱动电路的设计
(1)前级放大电路是将采集到的心电信号直接放大，该信号包含了很多背景噪声以及较高的共模信号，若这些干扰信号也随着心电信号一起被放大，将导致心电信号完全被湮没在噪声信号中，因此前级放大电路是关键，它必须满足高输入阻抗，高共模抑制比，低噪声，低漂移等特点。因此选用仪用放大器AD620，它采用经典的三运放改进设计，只需要一个电阻就能实现对增益的调节。它具有较高的输入阻抗和共模抑制比，能够很好地达到要求。对于前级放大的增益不宜过大，否则会使干扰信号过强，不利于后期处理。
(2)右腿驱动电路专为针对50Hz工模干扰，提高CMRR而设计的，原理是采用人体为相加点的共模电压并联负反馈，其方法是取出前置放大级中的共模电压，经驱动电路反相后在加回体表上，一般做法是将此反馈信号接到人体的右腿上，所以称为右腿驱动。通常，病人在做正常的心电检测时，空间电厂在人体产生的干扰电压以及共模干扰是非常严重的，而用右腿驱动电路就能很好地解决了上述问题。
图1 前置放大电路
由电路图1可知1脚和8脚之间的等效电阻RG20k6.67k，根据
3G49.4k1可得，该电路的增益RGG=8.41，其中电阻R
1、R2的匹配性会直接影响到该放大电路的共模抑制比，因此要尽量保持阻值的相等。
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图3 仿真结果
由图3仿真结果可以看出，输入1mV，40HZ的交流电压后，经AD620芯片 放大测量出的信号值达到12mV左右，有效值为8.64mV，即实际放大倍数为8.64倍，与理论值相近。
2、滤波电路的设计
因为电路所要求的频带范围为0.05Hz到100Hz，由于纯粹的带通滤波器的幅频特性不好控制，因此选择低通和高通两个滤波器串联，形成一个带通滤波器。低通滤波器的截止频率为100Hz，高通滤波器的截止频率为0.5Hz。在芯片选择方面，由于运放本身的频带范围会影响所做滤波器的特性，因此选择频带范围较宽的TL082做为滤波器的运放。TL082是一种通用的J-FET双运算放大器，能够用一个芯片来完成低通和高通滤波。我们采用二阶的滤波器，虽然滤波阶数越高，滤波效果越好，但是，滤波阶数过高了就会提高成本，而且阶数越高滤波电路结构会更加复杂，调试也更加有难度。二阶低通滤波相对于一阶来说，其滤波性能
1更加稳定，效果更好。图1为滤波电路。根据公式f得，截止频
2R1R2C1C2率分别为49Hz和0.08Hz，并其增益都为1。
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图1 带通滤波电路图
通过过对实际信号的滤波来检验滤波器的特性，心电信号是属于低频信号，则前级要放大的信号必定为低幅值、低频率的信号，由于信号的幅值和频率都很小，更加容易受到噪声的影响。在经过高通和低通滤波之后，可以看出滤波器在截止频率范围内提供了有效的滤波。
3、主放大电路设计
整个电路的放大部分主要由主放大来承担，由于前级的放大倍数为8.6倍，因此将主放大的倍数定在100倍，整个电路总的增益为860倍(陷波器的增益不包括在内)。这部分利用低偏置电压的TL081CD来承担。反向输入端的1K和100K的电阻决定100倍增益，同相输入端利用100K电阻平衡两端电压，增大共模抑制比。如图1所示：
图1 主放大电路仿真图
在同相输入端输入60Hz,1mV Vpp的正弦信号，经运算放大器放大后在6号脚测到信号Vpp约为10.1V，如图2所示：主放大电路的实际放大倍数大约在100倍，与理论值的误差是由芯片本身的特性以及电阻的失配引起。
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图2 主放大电路仿真结果
4、50HZ陷波器的设计
由于测得的心电信号中夹杂了工频干扰，难以去除，并且干扰信号的幅值与心电信号相近，严重影响了心电信号的识别，因此在对信号进行第二级放大时采用了一个陷波器，用于除去工频干扰。该陷波器的中心频率为50Hz，并且具有1.5倍的增益。50HZ陷波电路电路图如图1所示：
图1 陷波电路
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图2 仿真结果
理论上中心频率50Hz左右时有比较明显的衰减，而测量结果也跟理论相近，对于实际电路，采用频率50Hz，峰峰值为1V的，正弦信号进行测试，从图2中看出，经过陷波器之后，原本峰峰值为1V的信号，在1.5的增益下应该为1.5V，实际测得的增益为由于是50Hz的信号，衰减至0.1V，效果较明显。
5、总体电路设计
图1 心电采集设计框图
电路设计中最重要的是抑制信号中噪声的产生及对噪声信号的滤除，使其对心电信号本身的影响达到最小。本次实验中心电信号选择为0.5至100Hz之间的频带。因为心电信号幅值大致都在1mV至3mV之间，电路供电电压为±5V，因此选择放大倍数为800至1000倍。总的电路图设计如图2所示：
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图2 心电采集电路总图
图3 仿真结果
理论上的放大倍数计算得出，前置放大倍数为8.41倍，主放大倍数为100倍，所以总体放大倍数约为841倍。然而从图3的仿真结果看出，实际前置放大倍数约为7.57倍，这是因为带通滤波模块会衰减一部分信号，使总体的放大倍数减小，仿真实验到此成功结束。
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五、硬件电路及仿真
1、前置放大电路
在面包板上搭建了以AD620为中心的差动放大电路以后，用NI ELVIS软件仿真，输入一个频率为25Hz，峰峰值为1V的正弦信号，得出的结果如图1，可看出峰峰值放大了8倍左右，与软件仿真结果相近。当共模输入信号时，测得的共模增益小于0.001，如图2所示。
图1 前置放大电路测试结果
图2 共模输入测试结果
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2、带通滤波电路
用一个低通滤波电路和一个高通滤波电路搭建好一个带通滤波电路，软件仿真计算出的带通截止频率在0.08Hz-49Hz之间，但由于是实际的电路做不到理想化，所以信号从30Hz就开始衰减，如图1所示。
图1 带通滤波器测试结果
3、50Hz陷波电路
图1 陷波测试结果
图1可看出在中心频率为51Hz左右时的信号有明显的衰减，由于阻值的选择不同，所以测试结果与软件仿真结果存在一定的误差。
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4、后级放大电路
图1 后级放大测试结果
搭建好电路以后，测试得出图1的结果，由图可看出，后级放大倍数在110倍左右，与理论值的误差是由芯片本身的特性以及电阻R4和R5的失配引起。
5、总体电路
图1 差模输出 图2 共模输出
输入为25Hz，10mV的正弦波。采用差模输入时，输出为11.13V左右，放大1113倍采;用共模输入时，输出为1.59mV，放大0.16倍。 由公式CMRR10log(Ad2)可得，整个电路的共模增益为76.8dB。 Ac
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六、人体测量结果
图1 实际测量结果
在实际测量时，电极贴的位置及个人的皮肤状况也会影响测量结果。可以用清水湿润皮肤，并用砂皮磨掉表面的死皮，这样会使测量效果更加。同时被测人的体质不同也会对测量结果有影响。
图2 实际电路图
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在面包板上完成上述电路的搭建，并对每一部分都进行单独调试。最终的电路实物图如图2所示。左上为前置放大，使用了AD620芯片，左下为右腿驱动电路，使用的芯片为TL082CP，中上和中部构成了一个带通滤波电路，使用了两个TL082CP，中下为陷波电路，使用的芯片为OP07CP,右下为第二级放大，使用了TL082CP芯片。在实际测量时，采用三导联的方式，一根接右腿，其余两个分别接左右手，若分别接左右胸口效果会更佳，由于不是很方便就采用接左右手腕的方式。
七、 实验总结
1、难点
(1)前置放大电路中抑制共模信号的调制。
(2)消除随机噪声、工频噪声、内部噪声的干扰。 (3)电路图的设计，芯片、电阻等元件的选择。
2、调试经验
(1)开始连接的电路没有加入50Hz陷波电路，但在实际测量中有大量的工频干扰，于是加入了该模块，结果有效地一直掉了工频干扰。
(2)原来选择的低通滤波起的阻值为11K，理论计算出的截止频率为97.6Hz，但实际测量中大量的干扰频率在50Hz左右，于是修改了阻值，改为33K，这样可以滤掉更多的干扰，有利于得出正常的心电图。
(3)第一次没有成功测出心电信号，经讨论才知道是因为前置放大器模块没有做好，导致大量的共模信号进入了电路，由于心电信号非常微小，就被这些干扰信号淹没了，于是修改了差分输入的阻值，选择了两个特别接近的阻值，以减小共模干扰，计算出前置放大器的共模抑制比在0.001dB左右，有效抑制了共模干扰，最终得出了正常的心电信号。
(4)虽然最后实验成功了，但是还是存在一些干扰信号，说明滤波这一块还需改进。心电测量电路中对噪声的消除是十分重要的。外界噪声很有可能在电路的任何一部分掺杂进来，所以在最后再加一个低通滤波器滤除高频噪声是必要的。 (5)电极的放置对心电的影响也很大，放在一个准确的位置可以很容易地从示波器上看到清晰的波形，反之，心电信号太过微弱会被噪声完全淹没。
(6)实验中，有源滤波器比无源的滤波效果要好很多。两个有源滤波器串联构成的带通滤波器也比无源和有源串联的效果好。
(7)对于电容的选择：在本次实验中，用瓷片电容的效果比电解电容要好一点。因为瓷片电容构成的滤波器滤除高频成分的性能好，电解电容构成的滤波器滤除低频成分的性能好。
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一、血液细菌培养标本的采集和处理 临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者，需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才能正确实施有效的抗菌治疗，从而有助于治愈率的提高和医疗费用的降低。
1、采血时机：在患者发热期间越早越好，最好在抗菌治疗前，以正在发冷发热前半个小时为宜。
2、采血次数及间隔：在急性发热性疾病如脑膜炎、细菌性肺炎，需马上做抗菌治疗：或急性骨髓炎、化脓性关节炎等要紧急手术的患者，应立即从两臂分别取2份标本。对感染性心内膜炎患者，在24h内取血3次，每次间隔不少于30min;必要时次日再做血培养两次。对发热原因不明者两次抽血间隔60min;必要时于24~48h后再抽血2次。因为1次血培养不足以说明问题，且会遗漏阳性结果。国外有人统计1次血培养可检出菌血症的80%，2次检出90%，3次检出99%。国内统计17家医院1次血培养阳性率10.8%，18家医院2次以上血培养阳性率14.8%。
3、采血部位：多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌群污染的可能。要避免从血管插管内取血，因插管常被污染其结果不能反映真实情况。在不同部位取血，2次分离出同样菌种才能确定病原菌的有力证据。
4、采血量：成人菌血症或败血症的血液中含菌量较少，平均1~3ml血液中仅有1个细菌。所以采血量一定要足够。成人一般为10ml，新生儿与婴幼儿为1~2ml。有人引述多篇文章指出：对成人每增加1ml血量平均能提高阳性率3.2%。
5、培养基选择：培养基的质量对血液细菌培养阳性率的高低有非常重要的作用。市售培养基良莠不齐，选购时要慎之又慎注意质量，以知名大厂家生产为益。国内报告应用不同培养基的两组血培养结果，1组阳性率为9.7%，另1组为16.1%，可见培养基影响之大。抗凝剂现多用聚茴香脑磺酸钠(sodium polyanethol sulfonate SPS)浓度为0.025%~0.05%。因兼有抗凝、抗补体、抗吞噬几拮抗某些抗生素的作用，故较其他抗凝剂为优。
6、培养条件：尽管病原菌仍以需氧菌和兼性厌氧菌为主，但亦有少部分为真菌、厌氧菌或L型菌感染。特别是真菌感染有增加趋势可占病原菌10%以上。所以必要时应选取响应培养基在不同环境下培养。
7、盲传的必要：肉眼和仪器都不能确保在瓶外观察到所有的阳性菌生长，国内外的经验都证明这一点。因此在培养终结时盲目传代1次，以防漏检。
8、无菌操作：无论采取何种方法，在血液培养的全过程，从皮肤消毒、标本采取、运行、分离移种等，皆应十分注意无菌操作。用头皮针为新生儿和婴幼儿取血时，应换针头再将血注入培养瓶中。
二、下呼吸道分泌物(痰培养)的标本采取与质量要求
下呼吸道分泌物(痰)的细菌学检查对病原学诊断起着重要作用，但目前亦存在着严重的问题——标本的质量问题，因此，往往造成作出的病原菌诊断和实际引起感染的病原菌脱节，以致造成抗菌药物的应用不合理甚至耐药菌的出现和流行。痰标本的细菌学检查应注意如下几个问题。
1、标本的采取：自然咳痰：要求患者清晨留取，留取标本前应用水漱口3次，之后用力咳出。咳痰较困难者可用雾化蒸气吸入以利痰液咳出。幼儿可用手指轻扣胸骨柄上方以诱发咳痰。
2、气管穿刺法：仅用于昏迷患者，由临床医师进行。
3、纤维支气管镜抽吸：通常用于在患者行纤维支气管镜检查时顺便抽取。
4、胃液抽取法：多用于可疑患有肺结核的患者在有可能将痰液咽下的情况时采用。
5、标本的运送：标本采集后应立即送检，应争取在20min内送达检验科微生物室。
6、标本的贮存：微生物实验室收到标本后，应立即进行标本的质量检查及培养接种，如不能立即进行检查则应暂时放于普通冰箱(4℃)，冰箱中存放的标本应在24小时内进行检查。
7、标本的质量检查：(1)制成涂片行革兰染色;(2)于显微镜低倍镜下检查(10x10)，观察WBC及扁平上皮细胞存在情况，表1作为参考：
表1 痰标本显微镜检查的分类
分类
细胞数/低倍镜视野
(级)
白细胞
扁平上皮细胞
<25
<25
>25
<10
>25
10-25
>25
>25
10-25
>25
<10
>25
*分类中1~3类不做培养，要求重新留取标本：
4、5类为合格标本：6类为气管穿刺液，如未见到白细胞，而扁平上皮细胞>10/低倍镜视野，亦应重新留取标本。
8、特殊要求则作特殊处理，如做抗酸染色查找抗酸菌等。
9、分离培养：痰标本最好接种3种培养基，即血琼脂培养基、巧克力琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基(中国蓝培养基)。
10、显微镜检查的初步报告:在用显微镜检查标本质量的同时，对合格的标本(可进行分离培养的标本)，往往可以作出初步的病原学参考诊断，如革兰阳性菌、革兰阴性菌、球菌或杆菌、肺炎克雷伯菌、肺炎链球菌等。
三、尿液细菌培养标本的采集和保存
尿液的细菌培养检查对于膀胱和肾脏感染的及早发现和病原学诊断很有价值。对于尿道、前列腺以及内、外生殖器炎症的诊断也有一定价值。
1、标本收集：需在应用抗菌药物之前或停用抗菌药5d之后留取尿液标本：尿液 在膀胱内应停留6~8h以上，使细菌有足够的时间繁殖。(1)清洁排尿法：女患者以手指将阴唇分开，用肥皂水或碘伏清洗外阴，然后以清水冲洗尿道口周围，擦干并排出前段尿液后，用无菌容器接取中段尿;男患者应翻转包皮冲洗，用2%红汞或1：1000新洁尔灭消毒尿道口;婴儿消毒其阴部后，将无菌小瓶直接对准尿道口以橡皮膏贴于皮肤上，待排尿后立即送检。(2)膀胱穿刺法：为避免尿道正常菌群的污染，收集尿液最好的方法是膀胱穿刺。尤其做厌氧菌检查时必须采用膀胱穿刺法。穿刺时膀胱应充盈，皮肤严格消毒后用装有19或20号针头的注射器在耻骨联合距脐1/3处穿刺。膀胱穿刺的适应症有：[1]有尿道感染的临床症状，但中段尿培养细菌数很低，而又难以确定感染源者。[2]婴幼儿、新生儿不能用导管者。[3]怀疑有厌氧菌感染时。(3)肾盂尿采集法：若取左右两侧肾盂尿，应请泌尿科医生采取，左右侧的标本要标记明确，以免出现错误。(4)用封闭式引流装置的留置导尿患者留取尿液标本培养时，用适当的消毒剂严格消毒引流管和导尿管连接处的管壁，用装有21号针头的注射器穿刺导尿管壁吸取尿液。不可打开导尿管和引流管连接处收集标本，培养用的尿液标本也不能从引流袋中留取。(5)膀胱镜检查、输尿管插管或逆行肾盂造影时，收集的尿液可用来做细菌培养。(6)做病毒学检测时用容器收集清洁的标本即可，不需特殊方法收集。标本中加入抗生素可抑制细菌的过度生长，且标本需冷藏。 检测衣原体时，尿液标本不能代替尿(阴)道分泌物。
巨细胞病毒(MC)的检测，需多次检测标本，因其释放常是周期性的。
结核分枝杆菌的检查，应留取24h尿，无症状的血尿可能是肾结核病，应用清洁排泄法收集连续3份晨尿标本。
淋病奈瑟氏菌培养留取清晨第一次尿，盛于无菌容器内立即送检。
尿道结石标本可作其内部及表面培养，内部培养出的细菌与表面存在者可能不同。
2、标本的运送和保存：用无菌带螺帽的容器盛标本，标本应在1h内送检。超过2h者应重送，否则易致假阳性结果。
标本送达实验室后，若不能立即接种，可将标本置于冰箱(4~8℃)保存，但不得超过6h。
四、粪便标本微生物学检查的质量要求
关于腹泻患者粪便中肠道病原微生物的检测，根据世界卫生组织(WHO)腹泻病纲要和我国卫生部临床检验中心有关操作规程要求，粪便标本应取材得当，并严格按细菌分离培养操作规程进行各种病原微生物的鉴定。
1、标本采集：粪便标本应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集，直接用棉拭子，也可用直肠拭子，取双份粪便标本，1份置Cary-Bliar运送培养基中，另1份置灭菌小瓶中送检。
2、显微镜检查：粪便直接涂片革兰染色，可作为艰难梭菌、弧菌、弯曲菌、葡萄球菌、白色念珠菌等初步筛查，盐水滴片用作肠道寄生虫检查。
3、标本保存和运送：标本置Cary-Bliar运送培养基中，记录姓名、日期、标本号、放置冰壶中及时送检，一般可保存24h。
4、接种：收到标本应立即接种选择性培养基。
5、轮状病毒检测：可直接用ELISA法检测粪便标本中轮状病毒(RV)抗原，或从粪便中提取RV-RNA做聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)，根据轮状病毒特有RNA基因片段大小及其排列特点，判断结果。
五、生殖道标本的采集
1、男性标本：(1)如疑为急性淋病耐瑟菌或其他化脓性细菌感染应在清洗龟头部后，以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒剂消毒后，挤出分泌物立即以无菌棉拭子采取，立即送检，或以专用的细拭子插入尿道口1~2cm，旋转采取。(2)如疑为前列腺炎、精囊炎的慢性淋病耐瑟菌感染应由医师按摩前列腺，以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。
2、女性标本：(1)成年妇女自宫颈采取标本，应在扩阴器的支持下，选取有炎症或分泌物部位，先以无菌棉拭子拭去表浅层分泌物，再用另一拭子取分泌物送检。如做厌氧或真菌培养应另外采取标本。(2)如未成年幼女疑患性病传播疾病时，不应使用扩阴器，以一无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检。
六、胸腹水、脑脊液标本的采集
1、均由医师以无菌手续穿刺取得，必须应用带盖的无菌容器，立即送检。
2、此类标本在接种前应离心1500r/min15min或做增菌培养。
3、应接种血琼脂及巧克力琼脂温育于CO2环境中，结核分枝杆菌的培养应接种专用培养基。
一、静脉血标本的采集
1.操作者先洗手或用手消毒剂喷雾后揉搓待干;2.根据受检者检验项目选择真空采血 管;3.在穿刺点上方约6cm处系紧压脉带，嘱受检者紧握拳头，使静脉充盈显露，进行皮肤消毒;4.取下双向采血针头无菌帽，以左手拇指固定静脉穿刺部位下端，右手拇指和食指持采血针柄，使针头与皮肤呈30°角沿静脉走向快速刺入皮肤，然后呈5°角向前刺破静脉壁，进入静脉腔。见回血后，将针头顺势深入少许即可;5.将采血针的另一端刺入所需的真空采血管盖中央的胶塞中，血液自动流入试管。如需多管血样，将松开压脉带，嘱受检者松拳，用消毒干棉球压住穿此处，快速拔出针头，嘱受检者按压局部数分钟;6.取下采血针放入利器盒，将所采血样分别贴上相应的条码，抗凝血需立即颠倒混匀，及时送检。
二、动脉血气标本的采集
1.受检者取坐位或卧位，休息5min，应正常呼吸，避免憋气及过度通气，以免影响检 查结果;2.选择动脉血管后，常规皮肤消毒，用动脉采血针(内有肝素)垂直刺入血管，针管自动吸入0.5ml后，用消毒干棉球压住穿刺处快速拔出针头。局部按压5min以上，防止血肿形成;3.拔出后立即将针头用橡皮封闭，隔绝空气。随即挫动注射器，使血液与肝素充分混匀，立即送检。送检过程中要防止针头橡皮脱落，造成空气直接进入注射器。如有不慎脱落，必须如实向检验人员说明情况，并告知临床医生，以免影响检验结果和临床诊断。如确因不能及时送检，可将标本短时间内保存于4℃冰箱中。
三、生化检验标本的采集
注意病人生理因素对检验结果的影响，如年龄、性别、体型、情绪、运动、体位改变等。研究表明，CH、ALP、UA等项目易受年龄的影响，性激素的测定男女差别巨大。受情绪影响较大的项目有GLU、GH、CA、Cor、PRL等。另外，血清中CH、ALB、ALT、ALP、AST、TG、AMY及血清Ca等项目受体位改变因素影响较大。还应注意饮食对测定结果的影响，包括病人是否真正空腹及不进流食。空腹一般控制在12—16h最佳，过长或过短对某些测定结果可产生影响，如GLU、BUN、CR、ALB、UA、TG、电解质、肝功能等。个别项目需病人控制饮食，如血脂测定前最好连续素食3天，以防产生假性结果。注意药物对测定结果的影响，目前以证明至少有100多种药物对多项生化检验结果有影响，如利胆剂可使血清CH升高;肝素使血清CH降低，APTT显著升高，大剂量的维生素C对氧化酶法测定血清GLU有负干扰，CH、TG的Trinder反应产生负干扰，咖啡因造成血GLU、CH增高，冠心平导致血清中TG和LDH增高，大剂量青霉素可使血清CK、ALT、CR升高而BIL降低等。尽可能在标本采集前2d停服药物，却因治疗需要无法停药者，应在检验申请单上注明用药种类和剂量，以备参考。
此外，对采样时间要求严格的检验项目，应详细告诉病人真确记录时间，何时采取标本等事宜，如24h尿蛋白和电解质测定，糖耐量试验等。对于如激素易受生理因素影响的项目，需多次测定时，最好选择每天的同一时间采样，以便减少昼夜变化的影响，便于比较和分析。
四、葡萄糖耐量试验标本的采集
OGTT检查前三天停用胰岛素、肾上腺皮质激素等药物，可正常饮食(每天碳水化合物量一般控制在250—300g)。试验前一天晚上餐后不再进食(空腹8—124h)。标本采集后应立即送检，切忌不同时间点的多份标本采集后一起送检。
五、血液流变学标本的采集
采集前三天停用具有溶栓抗凝作用和降脂的药物，女性避开月经期。采集前空腹12h以上，前一天晚上低脂饮食，患者处于静息状态。避免在输液过程中采血，禁止在输液手臂同侧采集血液，抽血时病人取坐位肘部静脉采血。采血后立即送检并检测，最好在4h内完成，存放于4℃冰箱可延长至12h.血样不宜在0℃以下存放，以免RBC发生破裂。
六、疟原虫标本的采集
间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至十余小时采血为宜，恶性疟患者应在发作开始时采血。怀疑疟疾的患者一次检查阴性应多次复查，必要时骨髓涂片检查疟原虫。采集的静脉血标本应尽快送检，标本应及时制成学膜片。血膜片可于室温中保存，尽早检查。
七、微丝幼标本的采集
以晚上22时至次日凌晨2时病人从睡眠中醒来后，立即采血为宜。如夜间采血确有困难的病人可采用诱出法，即在白天口服海群生2~6mg/kg体重，15~30min后采集血液。采用试管浓集法：取含有0.4ml枸橼酸钠的真空试管(黑色盖子)，采集静脉血2ml注入试管，轻轻颠倒混匀6~8次，防止标本凝固。标本采集后应尽快送检，并及时制成血膜片尽快检查。检验后的剩余血液可以放在冰箱保存3d
八、乳酸测定标本的采集
检测前三天，待检者不要做剧烈运动，抽取标本前禁食12h.。在患者处于安静状态后2h采集标本，并嘱患者不可用力握拳。
九、血药浓度监测标本的采集
对于治疗药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。欲了解药物的长期效应，通常在药物的第5个半衰期(药物的稳定期)采血;欲了解药物的峰值效应，通常在用药1~2h采集(地高辛和毛地黄毒苷为6~8h)。
十、激素检测标本的采集
许多激素在一天24h内的分泌量不同的。如可的松在血液中的峰值为早晨4~6时，GH、LH和FSH均以阵发性方式释放。在测定此类激素时，有必要采集连续时间间隔的数份血标本，以其中间值为测定值;而血清中肾素活性在体位由卧位变为站位时，将出现明显增高。ACTH分泌峰值期在6~10时，低值期在0~4时，波动幅度为150%~200%。妇科激素采血前建议静坐30min，标本采集前需要停止类固醇药、甲状腺素、ACTH、雌激素或性腺激素的治疗，否则会影响检测结果。抽血检查时患者和医生应准确把握月经周期，以便解释检验结果。
十一、尿液分析表本的采集
患者留取标本前24h禁止服用维生素C等药物，勿食深色素食物。禁服磺胺类药物，禁止加甲醛等防腐剂。嘱患者清洁尿道口及周围皮肤，防止粪便、清洁剂、粉剂、油类及有色物质等污染尿液。最好留取晨尿或“二次晨尿”(清晨排空膀胱，空腹收集2h的尿液)，也可随时留取中段尿，尿量不少于10ml。尿标本2h内送检，避免强光照射。
十二、尿三杯试验标本的采集
取尿杯3个，标明
1、
2、3。于清晨第一次排尿时，分为三段排于3个尿杯中，每杯不少于5ml。第一杯留取最前段部分尿液，第二杯留取中段尿液，第三杯尽量留取最后段部分尿液。注意尿液要一次性排出，中间不可间断，留尿后立即送检。
十三、尿红细胞位相标本的采集
留取标本前病人按常规尿检准备。留取早晨第一次尿的中段尿(晨尿)10ml于洁净容器中(必要时清洗外阴)，2~8℃冷藏保存。早上8时到检验科时，留取新鲜的中段尿10ml于洁净容器里(必要时清洗外阴)，两次留取的尿液一并及时送检。注意留尿前不要喝大量的水(B超以后的尿不能用)且保证尿样不受污染(女性以避开行经期)。
十四、24h尿蛋白定量标本的采集
留取标本前病人按常规尿检准备。准备一洁净、无污染的干燥盛尿大容器，从检验科领取5ml甲苯作为防腐剂。具体步骤：1.在收集标本的第一天(如早晨7时)，病人排空膀胱中的的尿液，弃去不要。此后，连续收集24h的全部尿液排入大容器中。留取第一次尿液时把5ml甲苯一并倒入;2.在结束收集标本的第二天(如早晨7时)，病人排空膀胱中的尿液，收集于盛尿容器里;3.准确测量并记录总尿量;4.充分混匀全部尿液，取出约5ml于常规尿管中，贴上标识，送检验科检测，其余尿液弃去不要。注意24h留尿完毕后，须将全部标本充分混匀，准确记录尿量，再取出约10ml检测标本。
十五、大便常规标本的采集
必须使用洁净、干燥、无吸水性的的容器，禁止用棉拭子、纸巾、纸盒等留取或存放。尽量选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便，外观无异常的粪便必须从表面、深处和粪端多处获取标本。检查绕虫卵时，需用软黏透明纸拭子，在清晨排便前自肛门周围拭取标本，也可用棉拭子拭取，但必去立即送检。检查痢疾阿米巴滋养体，应于排便后迅速送检，立即检查。冬季采取保温措施。
十六、精液常规标本的采集
检查前禁欲(性生活、手淫及遗精)3~7d，已明确精子形成低下时，应禁欲7d后再收集标本。排精次数与禁欲时间可能对检查结果产生一定的影响，有报道禁欲时间过长，精液量虽然增多，但精子活力有所下降。留取标本前排净尿液，必要时清洗外阴部。用手淫或其他的方法，将一次射出的全部精液收入洁净、干燥的加盖容器内，有报道分布射精收集的各段精液分析中，最前段精液中精子的密度最高，以后各段渐依次减少，故精液采集时应收集全部标本。勿使用可能被酸碱污染或对精子产生影响的容器，乳胶或避孕套内含有抑制精子活力的滑石粉，应禁止使用。标本送检时需正确注明采样时间，30min内保温送检。精液常规检查如果出现一次异常结果，应隔1周后再复查，连续检查2次至数次，间隔应大于7d不能仅凭一次检查结果作出判断。
十七、常见临床微生物标本的采集
微生物检验工作的成败除了实验室的能力和效率外，很大程度上要看标本采集和送检环节的质量。由于标本的采集和处理不当，可能造成检验结果的假阳性和假阴性。因此微生物标本的采集应遵循如下原则：1.尽量在抗菌药物使用前采集标本。采集标本前应至少停药3d.如病人不能停药，应在下次抗生素使用前采集。2.标本采集时，应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌的污染。3.标本采集后应立即送至微生物实验室，放置时间过长会影响检验结果。如不能立即送检，一般应放2~8℃冷藏的条件下保存(血液培养采集后若不能及时送检，可于室温保存)。某些菌种(淋病奈瑟均、脑膜炎奈瑟菌、嗜血杆菌、肺炎链球菌等)。不仅要及时送检，而且再送检的过程中要注意保温。4.盛标本的容器必须经灭菌处理(到微生物实验室领取)，但不得使用消毒剂和酸类剂处理，以免残留物影响细菌的生长。送检时，标本切勿污染容器的瓶口和外壁，防止污染和传播。5.送检标本应注明标本来源和检验目的，以正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。 1. 血液及骨髓标本的采集：
采血的部位多为肘中静脉，疑为亚急性细菌性心内膜炎时，以肘动脉和股动脉采血：为宜。切忌在静脉点滴抗菌药物的静脉处采血。采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养瓶前，应更换针头或过火消毒。血培养瓶不用时放常温即可，不必放在冷藏室。
采血次数及间隔时间：急性发热性疾病(如脑膜炎、细菌性肺炎等)需尽快进行抗菌治疗。急性骨髓炎、化脓性关节炎等需要紧急手术的患者，立即从两臂分别采取2份标本。对感染性心内膜炎的患者再24h内采血3次，每次间隔不少于30min，必要时次日再作血培养2次。对发热原因不明者两次抽血间隔为60min，必要时于24~48h后再抽血2次。国外资料统计，1次血培养菌血症的检出率为80%，2次可达90%，3次可达99%.每次采血量成人5~10ml，婴幽儿为1~2ml。培养基：血液为10：1，以稀释血液中的抗生素、抗体、补体、溶菌酶等杀菌物质。有人主张对于长期接受抗菌药物治疗的病人，培养基：血液应大于20：1.骨髓一般采集1~2ml 血标本的采集和培养各环节必须严格无菌操作，以免发生标本的污染。同时，不可将血培养中出现的不常见细菌或一些皮肤表面的正常细菌随意的判断为污染菌。因为对一些大量使用抗生素、免疫制剂以及机体免疫力降低的病人，条件致病菌或非致病菌均可引起菌血症、败血症。两次血培养结果为同一种细菌，患者2~3周后血中抗体效价明显升高，应该作为菌血症的病原菌处理。
厌氧菌培养应作为血培养检查的常规方法，特别是疑为厌氧菌感染者。同时还必须注意L型细菌的培养。 2. 脑脊液标本的采集：
对患者进行腰椎穿刺，采集脑脊液3~5ml，盛于无菌试管和血培养瓶中送检。脑脊液标本尽量在抗生素治疗前采集，穿刺过程中应严格无菌操作，防止污染。由于脑膜炎奈瑟氏菌离体后容易自溶，流感嗜血杆菌及肺炎链球菌容易死亡，故标本采集后应立即送检微生物实验室。脑膜炎奈瑟氏菌等许多细菌对外界抵抗力比较弱，应注意保暖、防止干燥和日光直射。为防止采集的标本浑浊，最好进行“床边接种”，否则影响培养的阳性率。为了提高细菌的培养的阳性率，可在接种血平板、巧克力平板的同时，接种血液增菌培养基。 3. 尿液标本的采集：
中段尿采集法是临床最常见的采集方法，以晨尿为宜。女性病人在采样前应先用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口：男性病人翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口。对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用针管的细针头斜穿入管壁采集尿液：或拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前端的尿液，留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。切忌直接从集尿袋的下端关口留取标本。
确定菌尿是来自肾脏，可通过尿管采集肾盂尿。充分冲洗膀胱，以最后一次冲洗尿作为对照，然后将导尿管插入输尿管，做好左右标记，收集3次尿液。如果尿管细菌数比对照尿细菌数多或第三次尿比第一次多，则该细菌可能来自肾脏：相反，第一次尿菌数多余第三次尿菌数，则可能来自膀胱。 尿厌氧菌培养或儿童婴幼儿的中段尿留取困难，必要时可经耻骨上穿刺收集无污染的膀胱内尿液。厌氧菌的培养尚需在取得尿液后，针头插于橡皮塞上立即送检。
尿液标本采集和培养最大的问题是杂菌污染，所以应严格无菌操作。耐心细致的向病人说明如何留取中段尿。室温下，尿标本耽搁稍久可致尿内的细菌明显增高，影响病原菌和污染菌的区分。不能立即送检者，可暂时放4℃冰箱保存，但不能超过8h。此外，应在用药前或停药3d后采集尿液，因为治疗所用药物多数均通过尿液排泄。尿液标本不得加入防腐剂和消毒剂，否则影响细菌的培养结果。 4. 下呼吸道标本的采集：
合格痰标本的采集是取得正确检验结果的关键。临床微生物工作人员应耐心指导患者如何采集标本，要求采集肺深部的痰液(不是唾液)，一般以晨痰最好。清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部用力咳出新鲜的痰液于无菌容器内送检(尽可能的减少口腔正常菌群的污染)。痰量少者，可用4℃10%NaCL溶液雾化吸入导痰。
支气管扩张症或支气管有相通的巨大空洞的患者，清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰液;对咳嗽乏力和昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管内吸引痰液;用纤维支气管可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但应避免咽喉部正常菌群的污染;双侧肺部感染伴人工气道(如气管切开或气管插管)的患者，可用吸痰管经人工气道插至叶支气管水平吸引痰液;对重症、难治、有免疫缺陷或因厌氧菌引起的医院内肺部感染，必要时可采用环甲膜穿刺经气管吸引(TTA)、经胸壁穿刺肺吸引(LA)经纤维支气管或人工气道作防污染双套管毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)，采集无口咽部菌群污染的痰液，进行精确的感染病原学诊断。
痰液标本不能及时送检者，可暂置4℃冰箱存放。如室温下耽搁数小时，使定植于口咽部的正常菌群过度生长，肺炎链球菌、嗜血杆菌等苛氧菌的检出率将明显下降。 5. 咽拭子及鼻咽拭子标本的采集：
咽部是呼吸和食物的通道，晨起采集最好。医生采集标本时应戴口罩和手套，以防传染。病人先用清水漱口，由检查者将舌向外拉，使悬雍垂尽可能向外牵引，将咽拭子越过舌根，到咽喉壁或悬雍垂的后侧反复涂抹数次，避免接触口腔和舌黏膜，尽可能减少污染。检查脑膜炎奈瑟氏菌或白喉棒状杆菌时，如咽部有明显发红或有伪膜存在，应在局部涂抹取材后，小心地将棉拭子立即放入无菌管中。对局部无病变或带菌者检查，应于咽部或扁桃体上用棉拭子涂抹。采集扁桃体部位的标本时，应以小窝为宜;高度疑似白喉时，应在咽喉部深层组织中采集标本，而表面渗出液多为类白喉棒状杆菌和葡萄球菌。标本的采集虽然在时间上无严格控制，但最好在抗生素治疗前采集。采集前数小时不得用消毒药水漱口或涂抹病灶居部。标本采集后应立即送检。因为苛氧菌(如肺炎链球菌、嗜血杆菌、卡他布兰汗菌)离开人体后容易死亡。
6. 化脓及创伤感染标本的采集：
对采集标本的部位，应用无菌生理盐水洗净病灶表面的污染菌，对皮肤粘膜充分消毒。采集标本前，病灶部位应避免使用抗菌药物和消毒剂。如果局部伤口已用磺胺类药物和抗生素治疗，则应在培养基内加入相应的物质(如青霉素酶、对氨基苯甲酸等)，以提高细菌培养的阳性率;创面出血敷用药物2h以内，烧伤在12h内，不应采集标本，此时细菌培养阳性率较低。
开放性脓肿及脓性分泌物的采集：首先用无菌生理盐水擦洗病灶表面。用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物，置培养基送检。如为瘘管，应在无菌条件下采取组织碎片于无菌试管中送检。
闭锁性脓肿的采集：对病灶周围的皮肤及黏膜表面先用2.5%~3.0%的碘酊消毒，再用75%的酒精脱碘，用无菌注射器穿刺抽取内容物立即送检。疑为厌氧菌感染时，取材后立即排空注射器内空气，同时将针头插入橡皮塞中立即送检。
大面积烧伤创面分泌物的采集：由于创面的部位不同，细菌的种类也不同，应用无菌棉拭子采集多部位的分泌物，分别送检。有时也可将浸有脓液的最内层敷料放入无菌平皿内送检，或放入无菌肉汤中送检。
对怀疑放线菌感染的标本，常用无菌棉拭子挤压瘘管，选取流出脓液中“硫磺样颗粒”，盛于无菌试管中送检;或将无菌纱布条塞入瘘管中，次日取出送检。
标本采集后应立即送检，否则应放冰箱保存，以防杂菌污染。另外采集标本时应注意观察分泌物的形状、颜色及有无恶臭味等，作为培养和鉴定提供依据。 7. 粪便标本的采集：
大多采用自然排便采集法，即排便后，挑取有脓血、黏液、糊状、米泔样等性状异常部分的粪便，盛入无菌广口瓶中送检。不能立即送检者应放入Cary-Blair运送培养基中保存。对不易取得粪便或排便困难的患者或婴幼儿，可采用直肠拭子采集法。将拭子前端用无菌甘油水湿润，，插入肛门4~5cm处(幼儿2~3cm)，轻轻旋转擦取直肠表面的黏液后退出，置培养基中送检。腹泻病人应尽量在急性期用药前采集(3d以内)。以提高细菌培养阳性率。怀疑厌氧菌感染(主要是艰难芽孢梭菌)时，最好排便后立即培养。尽管粪便标本中有很多杂菌，但采集时也应放入无菌瓶中送检，以免影响致病菌的分离及误诊。在不得已时可将粪便至于无菌容器内4℃保存，但不能超过24h.不能采用冷冻-20~-80℃保存，会使活菌数量显著减少。
8. 胆汁的采集：
无菌操作，有专职医师用导管做十二指肠引流，采取的胆汁分为A、B、C三部分。A液来自总胆管，橙黄或金黄色;B液来自胆囊，黄绿色;C夜来自肝胆管，柠檬色。因引流是导管通过口腔，易污染口腔中的正常菌，一般认为B液适宜做细菌培养。行胆囊造影术，可同时采集胆汁，即胆囊穿刺法。另外，在进行胆囊及胆管手术时，可由总胆管、胆囊直接穿刺采集胆汁。这两种操作方法不易污染，适宜作细菌培养。采集标本后立即送检，否则应放入4℃冰箱保存。由于胆汁细菌培养阳性率较低，在接种血平板及其他平板的同时应接中肉汤培养基增菌，待肉汤浑浊后再转种相应的平板，以提高培养阳性率。
9. 穿刺液标本的采集：
穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等，由临床医师行穿刺术抽取。标本的抽取，在病人用药前或停药1~2天后行无菌操作，防止污染。胸腹水可抽取5~10ml，心包液、关节液、等抽取1~5ml，放入无菌瓶或肉汤曾均培养基中，混匀后立即送检。不能立即送检的可暂时置于4℃冰箱保存。怀疑厌氧菌感染时，抽取后立即排空注射器内空气，针头插入橡皮塞中立即送检或床边接种。
10. 生殖道标本的采集：
生殖器官是开放性器官，采集标本过程中应严格无菌操作，减少杂均污染，根据不同的感染类型及病变特征采集不同的标本。采集尿道标本时，应用无菌生理盐水局部冲洗，以无菌拭子插入尿道口1~2cm停留10s，轻轻旋转拭子后退出;对外阴部糜烂、溃疡者，生理盐水冲洗后用无菌拭子擦去病灶边缘的分泌物;阴道及尿道口的分泌物需在窥阴镜下，用无菌长棉拭子采集，子宫内分泌物用无菌导管抽取，导管外套一层保护膜，插入子宫过后再穿刺该膜，负压吸引，可减少阴道菌群的污染，女性盆腔脓肿时，在阴道局部消毒，由直肠子宫凹陷处进针抽取。前列腺液的采集皮肤消毒后，有临床医师行前列腺按摩采集。怀疑淋病奈瑟氏菌感染时，由于其抵抗力差且有自溶性，标本采集后应立即送检，或床边接种，以提高细菌培养阳性率。阴道内有许多正常菌群，采集宫颈标本时，应尽可能不触及阴道壁。生殖道厌氧菌感染也多见，采集标本时应避免与氧气接触，应作床边接种或置厌氧运送培养基中送检。
十八。其他特殊项目的标本采集
肿瘤标志物组合，避免产生大量气泡和用力振荡试管而造成标本溶血。若检测PSA，采血前48h内不得作前列腺按摩、前列腺指诊、穿刺、灌肠、直肠指诊、直肠内超声和膀胱镜检查等，否则会使测定结果偏高;检测β-HCG时，若使用激素类药物，应在送检单上注明，怀孕或流产后检测HCG时最好也要注明;甲状腺功能检测抽血时宜用酒精消毒(不可用碘酒或碘伏);微量元素标本才几千患者应出入静息状态，避免剧烈运动和情绪激动。
标本的输送、验收与拒收 一.送检
送检人员受到样本后，须在各病区护士站LIS系统中将接受到的标本进行条码确定。标本送到检验科后，在检验科LIS系统中，检验人员将送检到的标本条码接受。正常作息时间内的急诊标本，由护工送至各专业组，并进行验收登记;夜间值班时的急诊标本，由护工将标本送至急诊检验室，由值班人员进行核对、接收、登记和处理，对不合格标本与临床联系后拒收和回退。标本收集人员必需清点标本个数是否与送检单相符，并安全送到检验科。送检过程中要注意环境对标本的影响。有时应避光(如阳光直射下血中胆红素会分解)，样本有温度要求，应确保样本置于适合的容器内。要保证标本运送途中的安全，防止过度震荡，标本被污染，唯一表示的条码丢失和混淆，标本对环境的污染，水分蒸发等。对于疑有高致病性病原体标本，应按《病原微生物实验室管理条例》的相关要求运送。同时，由于血细胞的代谢、气体交换及物质转移等因素，标本放置时间过久，易使血细胞内外多种成分发生变化，导致分析结果发生误差。因此标本采集后应及时送检，有些检测项目的标本(如血气分析)应立即送检。晨起批量标本采集，各临床科室应充分考虑采样与送检之间的间隔时间，一般要求在上午上班前送达相应实验室。 二.验收
标本送至实验室后有专人验收，验收基本程序：1.唯一性标识是否正确无误;2.申请检验项目与标本是否相符;3.标本容器是否正确，有无破损;4.检验标本的外观和标本量，包括有无溶血，血清有无乳糜状、抗凝血中有无凝块，，以及细菌培养的标本有无污染的可能;5.检查标本采集时间到接收时间的间隔;6.特殊标本需要送收双方签收。 三.拒收
遇到下列情况检验科可以拒收标本：1. 唯一性标识错误、不清、涂改、脱落和丢失，标本标识码与申请单或采样清单不一致;2.用错标本容器(如用错真空采集管)或容器破损难以补救;3.人为因素的严重溶血、脂血标本;4.抗凝血中有凝块，抗凝血未加抗凝血剂或血液与抗凝剂比例不正确(如血沉、抗凝因子测定等);5.标本量严重不足;6.不应接触空气而接触了空气(如血气分析)，细菌培养的标本被污染;7.采集标本离送检间隔时间过长。
正确标本采集应注意的问题
选择最佳采样时间，采集具有代表性的标本。
容器洁净度或无菌程度符合检验要求。注意抗凝剂、防腐剂的正确应用，防止污染。如细菌培养的容器绝对不能有防腐剂，微量元素测定对容器结晶要求远高于其他检测，24h或12h尿中某些成分分析需加防腐剂等。
静脉采血时扎止血带时间应尽可能短(一般不超过1min)，抽血速度不宜过快，以免产生大量泡沫，造成标本溶血。防止过失性的采血(如采错部位、用错真空管等)，防止边输液边采血，禁止在输液同侧采血。含抗凝剂的真空试管采血后须及时混匀标本(轻轻点到混匀切忌用力振荡试管)，防止凝块和凝固。
需要毛细血管末梢采血时，由检验人员采集。皮肤消毒后，一定要待酒精分发干燥后采血，否则血液四处扩散而不成滴。采血时应选取无炎症、水肿、冻疮等部位，烧伤患者选择皮肤完好处采集，除特殊情况外，不要采集耳垂血。穿刺深度一般为2.0~2.5mm为宜，切忌用力挤压或离伤口较近处挤压，否则会使大量组织液渗出稀释血液，同时易激活凝血系统使血液凝固。
标本严重脂血和黄疸问题：严重脂血可干扰某些光谱反应。如影响肝功能、血脂等项目测定;黄疸产生光谱干扰苦味酸法测定Cr，造成Cr检测结果偏低。
不同试验项目在使用抗凝剂时，注意与样本的比例：如血GLU测定一般加入氟化钠—草酸钠混合抗凝剂，防止糖酵解;肾功和电解质等常使用肝素抗凝;病理性腹水、胸水和脑脊液应加入肝素，防止蛋白质凝固;24h尿PRO等生化测定则应加入甲苯等防腐剂，抑制微生物生长繁殖。凝血功能血样试管中的抗凝剂与采样量有严格的比例要求(1：9)，差别过大显著影响检验结果。
溶血问题：避免标本溶血是保证标本质量的重要环节。采血时的一些不良习惯和劣质采血器具均易造成溶血，如采血时定位会进针不准，针尖在静脉中反复探测。均会造成血肿和溶血;混匀含添加剂的试管时用力过猛，或运输时动作过大;从已有血肿的静脉采血;采血时有空气进入或产生泡沫等。相对于添加剂而言，采血量不足等也会导致溶血。溶血标本可使多个项目的检验结果出现大的误差，血液中某些物质在红细胞内的浓度比血浆高许多倍。轻微溶血即可造成对检验结果的较大影响，如血清钾、镁、心肌酶等。实验时发现显性溶血标本后，应区分是病理性溶血(血管内溶血)，还是技术性溶血(由于操作技术或采血容器造成的体外溶血)，签发报告时注明。实验时还应特别注意排除非显性溶血对检验结果造成的影响。
一、
二、 登录网址：http://wsbs.jsychrss.gov.cn/sbk/login.php 选择个人登录
三、 人员信息采集
注意：照片不用上传，只要保证身份证号正确填写即可!
四、确认完毕后，一定要点击“提交”按钮，确定信息为“已确认”状态!
生化检验用的血液标本可来自于静脉、动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本，静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。
(一)静脉采血法
1.采血步骤
采血前要核对病人姓名、年龄、性别、编号及检验项目等，按试验项目要求，准备好相应的容器，如空白试管、抗凝管或促凝管等。病人应取坐位或卧位，采血部位通常是前臂肘窝的正中静脉。若用普通采血法，采血后应取下针头，将血液沿管壁缓慢注入试管内。
2.注意事项
(1)很多生化成分受膳食影响，因此，采血前要确认病人是否空腹。
(2)避免充血和血液浓缩：采血时应动作迅速，尽可能缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过半分钟，否则将使生化结果升高或下降。
(3)若病人正在进行静脉输液，不宜在输液同侧手臂采血;若女性病人做了乳腺切除术，应在手术对侧手臂采血。
(4)采血的体位：体位改变可引起一系列的生理变化，使血液中的许多指标发生改变。一般采取直立位采血，其二标本的测定值比卧位高5%～15%。因此，采血时要注意保持正确的体位(坐位或卧位)，以及体位的一致性。
(5)采血时只能向外抽，决不能向静脉内推，以免注入空气，形成气栓而造成严重后果。
(6)防止溶血：造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清洁;穿刺不顺利，组织损伤过多;淤血时间过长;抽血速度太快;血液注入容器时未取下针头或注入速度过快产生大量泡沫;震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后，未取针头直接将血注入真空管内，也易造成溶血。体内溶血属合格标本，但应在报告单上注明。
(二)动脉采血法
肱动脉、股动脉、桡动脉以及其它任何部位的动脉都可以作为采血点，但多选择肱动脉和桡动脉。在摸到明显搏动处，按常规消毒，左手固定搏动处，右手持注射器，针头成60°角刺入，血液将自动进入注射器内。
(三)真空采血法
双向针一端插入真空试管内，另一端在持针器的帮助下刺入静脉，血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血，避免了血液外溢引起的污染，并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和试验用途。
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